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蛋白质技术手册 汪家政 范明 主编

时间:2021-10-9 9:20:45 作者:1244748665 来源:蛋白 阅读:757次
蛋白质技术手册 汪家政 范明 主编
本书是关于蛋白质分析和分离的实验室技术操作手册。蛋白质是一种极具多相性的生物大分子,离开其天然环境,蛋白质分子极不稳定,在细胞中和抽提液中蛋白质的性状也不尽相同。蛋白质有多种类型,通过不同的方法我们可区分可溶性蛋白、膜结合蛋白、具有催化功能的蛋白或结构蛋白及转录调节蛋白。
从正常生物基质中提取各种蛋白质均需要有特定的条件。如果不能满足这一条件,蛋白将很快的失去生物学活性,其生物半衰期也将迅速降低。因此,在蛋白质的特性研究中,确定提取条件是一个关键问题。在不同的实验中所遇到的困难各不相同,有的困难是如何抵抗外源性蛋白酶的作用而维持蛋白质的稳定,在有些实验中的困难是如何维持酶的活性。在不同的实验中要针对不同的情况来解决不同的问题。然而对蛋白质研究而言却有着一些共同的参数。在本章中我们来讨论这些参数并希望能给蛋白质实验研究工作提供-..些总体的线索和方法。
1.2 缓冲液
1.2.1 缓冲液的性质
缓冲液可以抗衡蛋臼质溶液中pH值的改变,选择合适的缓冲液对于维持--定pH偵下蛋白质的稳定及保证实验的重复性十分重要[4,20]。pH和pK。是描述缓冲液的两个重要概念。pH值是指溶液中氢离子浓度的负对数,pH=-log (H+ )。pK。 值是溶液中酸解离常数的负对数值。溶液的pH值与pKg值越接近,表明溶液的缓冲能力越强,离pK。值越远则缓冲能力越弱。

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