食品卫生微生物学检验标准2003年版

 
食品卫生微生物学检验标准 2003年版 
 
 
注：(2009-8-22，jackli01对本书中新更新的标准进行替换，目录中的红字字体标准为最新版本的标准)

GB/T 4789.1-2008------------------------------------------------4
GB/T 4789.2-2008------------------------------------------------11
GB/T 4789.3-2008------------------------------------------------19
GB/T 4789.4-2008------------------------------------------------29
GB/T 4789.5-2008------------------------------------------------51
GB/T 4789.6-2003------------------------------------------------57
GB/T 4789.7-2008------------------------------------------------65
GB/T 4789.8-2008------------------------------------------------79
GB/T 4789.9-2003------------------------------------------------89
GB/T 4789.10-2008-----------------------------------------------104
GB/T 4789.11-2003-----------------------------------------------119
GB/T 4789.12-2003-----------------------------------------------124
GB/T 4789.13-2003-----------------------------------------------130
GB/T 4789.14-2003-----------------------------------------------135
GB/T 4789.15-2003-----------------------------------------------141
GB/T 4789.16-2003-----------------------------------------------146
GB/T 4789.17-2003-----------------------------------------------178
GB/T 4789.18-2003-----------------------------------------------182
GB/T 4789.19-2003-----------------------------------------------186
GB/T 4789.20-2003-----------------------------------------------191
GB/T 4789.21-2003-----------------------------------------------195
GB/T 4789.22-2003-----------------------------------------------199
GB/T 4789.23-2003-----------------------------------------------203
GB/T 4789.24-2003-----------------------------------------------207
GB/T 4789.25-2003-----------------------------------------------211
GB/T 4789.26-2003-----------------------------------------------214
GB/T 4789.27-2008-----------------------------------------------224
GB/T 4789.28-2003-----------------------------------------------234
GB/T 4789.29-2003-----------------------------------------------275
GB/T 4789.30-2008-----------------------------------------------281
GB/T 4789.31-2003-----------------------------------------------298
GB/T 4789.32-2002-----------------------------------------------308
GB/T 4789.33-2003-----------------------------------------------317
GB/T 4789.34-2008-----------------------------------------------321
GB/T 4789.35-2008-----------------------------------------------333
GB/T 4789.36-2008-----------------------------------------------343
GB/T 4789.37-2008-----------------------------------------------359
GB/T 4789.38-2008-----------------------------------------------372
GB/T 4789.39-2008-----------------------------------------------387
GB/T 4789.40-2008-----------------------------------------------395 ICS 07.100.30
C 53
GB/T 4789.32—2002
食品卫生微生物学检验
大肠菌群的快速检测
Microbiological examination of food hygiene—
Rapid detection of Coliform bacteria
 
 
 
2002-06-13发布 2002-10-01实施GB/T 4789.32—2002
I
前    言
本标准规定了食品中大肠菌群的快速检验方法。本标准规定使用的培养基MUGal肉汤中的4-甲基
伞型酮-β-D-半乳糖苷与美国联邦法规40，第141节，21款(Code of Federal Regulations 40, Part
141.21)规定的检验大肠菌群所用的MI琼脂的主要成分(4-甲基伞型酮-β-D-半乳糖苷)是同一物质。
本标准关于大肠菌群的菌落计数，参考了ISO  4832:1999(E)《微生物学-大肠菌群菌落计数法通则》
(Microbiology-General Guidance for the enumeration of coliforms-colony count technique)。
本标准中的附录A是规范性附录。
本标准由国家质量监督检验检疫总局提出并归口。
本标准主要起草单位：镇江出入境检验检疫局，中国标准化协会，镇江质量技术监督局。
本标准主要起草人：甄宏太、李平、张秀春、闵继福。 GB/T 4789.32—2002
II
引 言
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸或醛，并产生β-半乳糖苷酶需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无
芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有
否污染肠道致病菌的可能。如果大肠菌群存在于食品中，表明未做有效的消毒处理、加工后保存条件不
良或消毒后又受到污染。快速检验这些细菌，有助于食品的卫生管理，维护消费者的食用安全。 GB/T 4789.32—2002
1
食品卫生微生物学检验
大肠菌群的快速检测
1 范围
本标准规定了食品中大肠菌群的快速检验和计数方法。
本标准适用于食品中大肠菌群的快速检验和计数。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的
修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 4789.3 食品微生物学检验 大肠菌群测定
GB 4789.28 食品微生物学检验 染色法培养基和试剂
ISO 4832:1991(E) 微生物学-大肠菌群菌落计数法通则
3 术语和定义
下列属于和定义适用于本标准
3.1
3.2 大肠菌群  Colifrom bacteria
大肠菌群是革兰氏阴性、无芽孢、氧化酶阴性的杆状细菌，为需氧和兼性厌氧，可在有胆盐（或具
有其他抑制生长的表面活性剂）存在的情况下生长，通常可在36℃±2℃发酵乳糖并产酸和醛。具有β-
半乳糖苷酶。在本标准设定的条件下，大肠菌群为能分解β-半乳糖苷，使培养基发出荧光或生成紫色
（或红色）菌落的一群革兰氏阴性无芽孢杆菌。
4 原理
4.1 最可能数(MPN)法
大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶， 分解液体培养集中的酶底物——4-甲基伞型酮-β-D-半乳糖苷 （以
下简称MUGal）,使4-甲基伞型酮游离，因而在366nm的紫外光灯下呈现蓝色荧光。
4.2 平板法
大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶， 分解培养集中的酶底物--茜素-β-D半乳糖苷 （以下简称Aliz-gal） ,
使茜素游离并与固体培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色（或红色）的螯合物，使菌落呈现相
应的颜色。
5 试剂和培养基
5.1 磷酸盐缓冲液
按GB 4789.28-1994中3.22规定进行制备。
5.2 生理盐水
5.2.1 成分
氯化钠8.5g
 GB/T 4789.32—2002
2
蒸馏水   1 000mL
5.2.2 制法
将氯化钠溶于蒸馏水，121℃蒸汽灭菌15min。
5.3  MUGal肉汤
5.3.1 成分
胰蛋白胨或胰酪胨      20.0g
氯化钠         5.0g
无水磷酸氢二钾       2.75g
无水磷酸二氢钾       2.75g
月桂基硫酸钠       0.1g
MUGal(纯度不低于99%)     0.08g
蒸馏水         1 000mL
5.3.2 制法
将各成分加热溶于蒸馏水中，以 15％～20％氢氧化钠溶液调整 pH 值，分装于 20 mm×150 mm试
管，每管 9 mL，116℃蒸汽灭菌10 min，最终pH值7.0～7.2。待培养基冷却后，以无菌手续于每管培养
液内加入 0.1 mL 经无菌水稀释的 500 µg/mL 头孢磺定液或于 1000mL 灭菌培养液内加 1 mL经无菌
水稀释的5 mg/mL头孢磺啶液并以无菌操作分装试管。
注： 双料的MUGal肉汤除蒸馏水外其他成分加倍
5.4  Aliz-gal琼脂
5.4.1 成分
胰蛋白胨或胰酪胨      20.0g
氯化钠         5.0g
无水磷酸氢二钾       2.75g
无水磷酸二氢钾       2.75g
月桂基硫酸钠       0.1g
Aliz-gal（纯度不低于97%）    0.05g
异丙基硫代半乳糖苷      0.03g
硫酸铝钾        0.5g
柠檬酸铁铵        0.5g
琼脂         15.0g
蒸馏水         1 000mL
5.4.2 制法
将各成分放入蒸馏水中，加热使溶化，以15％～20％ NaOH 调整pH值，分装烧瓶，116℃蒸汽灭菌
10min，最终pH值 7.0～7.2。
6 设备和器材
6.1  培养箱：37 ℃ ± 1℃。
6.2  冷藏箱：0 ℃ ± 4℃。
6.3  天平：感量 0.01g。
6.4  均质器或乳钵。
6.5  平皿：直径90mm。
6.6  试管：20mm x 150 mm。
6.7  吸管：1.0mL和10.0mL。
 GB/T 4789.32—2002
3
6.8  广口瓶或三角瓶：容量500mL。
6.9  玻璃珠：直径约5mm。
6.10  试管架。
6.11  紫外灯（波长366nm）。
6.12  其他。
7 检验程序