GB 7918.1-1987 化妆品微生物标准检验方法 总则

中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准
UDC  6 6 8 . 5 8:5 7 6
化妆品微生物标准检验方法
   细 菌 总 数 测 定
. 8 5 . 0 7
GB  7918.  2一 87
S t a n d a r d  me t h o d s  o f  mi c r o b i o l o g i c a l
       e x a mi n a t i o n  f o r  c o s me t i c s
           S t a n d a r d  n l a t e  c o u n t
     细菌总数系指 1 8或1  m l 化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染
的程度， 以及生产单位所用的原料、 工具设备、 工艺流程、 操作者的卫生状况， 是对化妆品进行卫生学评
价的综合依据.
     本标准采用标准平板计数法。
1 方法提要
     化妆品中污染的细菌种类不同. 每种细菌都有它一定的生理特性， 培养时对营养要求. 培养温度、 培
养时间、 p H值、 需氧性质等均有所不同。在实际工作中， 不可能做到满足所有菌的要求， 因此所测定的
结果， 只包括在本方法所使用的条件下( 在卵磷脂、 吐温8 0 营养琼脂上， 于3 7 ℃培养4 8  h ) 生长的一群
嗜中温的需氧及兼性厌氧的细菌总数。
2 培养基和试荆
2 . 1 生理盐水: 见G B  7 9 1 8 .  1 -  8 7 《 化妆品微生物标准检验方法 总则》 。
2 . 2 卵磷脂、 吐温8 0一 营养琼脂培养基
     成分: 蛋白陈 2 0 g
             牛肉膏 3 g
             氯化钠 5 g
           琼脂 1 5 g
             卵磷月 旨 1 g
             吐温8 0                        7 g
             蒸馏水 1 0 0 0 m1
     制法: 先将卵磷脂加到少量蒸馏水中， 加热溶解， 加入吐温8 0 将其他成分( 除琼脂外) 加到其余的蒸
馏水中， 溶解.加入已溶解的卵磷脂、 吐温8 0 , 混匀， 调p H值为7 . 1 7 .  4 ， 加入琼脂， 1 2 1 ' C  ( 1 5 1 b )
2 0  m i n 高压灭菌， 储存于冷暗处备用。
3 仪器
   3 . 1
3 。 2
3 . 3
3 . 4
锥形烧瓶。
量筒。
p H计或精密p H试纸。
高压消毒锅。
中华人民共和国卫生部 1 9 8 7 一 0 5 一 2 8 批准 1 9 8 7 一 1 0 一 01实施GB  7918.2一 87
3 . 5 试管。
3 . 6 灭菌平皿: 直径9 c m,
3 . 7 灭菌刻度吸管: 1 0 ml ,  2 m1 ,  l ml ,
3 .  8 酒精灯。
3 . 9 恒温培养箱。
3 .  1 0 放大镜。
4 操作步软
   4 .  1 用灭菌吸管吸取I: 1 0 稀释的检样2 m l ， 分别注入到两个灭菌平皿内， 每皿] m l 。另取l m l 注入
到9 m 1 灭菌生理盐水试管中( 注意勿使吸管接触液面) . 更换一支吸管， 并充分混匀， 使成 I: 1 0 0 稀释
液。吸取 2 m l ， 分别注入到两个灭菌平皿内.每皿 l  m l 。如样品含菌量高. 还可再稀释成 1:1 0 0 0 ,
1 : 1 0 0 0 0 , … 等. 每种稀释度应换1 支吸管.
   4 . 2 将熔化并冷至4 5 ^5 0 ℃的卵磷脂、 吐温8 0 、 营养琼脂培养基倾注平皿内， 每皿约 1 5 ml ， 另倾注
一个不加样品的灭菌空平皿， 作空白对照。随即转动平皿， 使样品与培养荃充分混合均匀， 待琼脂凝固
后， 翻转平皿， 置3 7 ℃培养箱内培养4 8 h ,
5 菌落计数方法
     先用肉眼观察， 点数菌落数， 然后再用放大5 ^ - 1 0 倍的放大镜检查， 以防遗漏。记下各平皿的菌落
数后。求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长
时， 该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半， 而其余一半中菌落数分布又很均匀， 则可将此半
个平皿菌落计数后乘2 ， 以代表全皿菌落数.
6 菌落计擞及报告方法
   6 .  1 首先选取平均菌落数在3 0 -3 0 0 之间的平皿， 作为菌落总数侧定的范围。当只有一个稀释度的
平均菌落数符合此范围时. 即以该平皿菌落数乘其稀释倍数( 见表中例1 ) ,
   6 . 2 若有两个稀释度， 其平均菌落数均在3 0 -3 0 0 个之间， 则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ， 应报告其平均数， 若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2 及例3 ) ,
   6 .  3 若所有稀释度的平均菌落数均大于3 0 0 个， 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告
之( 见表中例4 ) .
   6 . 4 若所有稀释度的平均菌落数均少于3 0 个， 则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告
之( 见表中例5 ) ,
   6 .  5 若所有稀释度的平均菌落数均不在 3 0 ^ - 3 0 0个之间， 其中一个稀释度大于3 0 0个， 而相邻的另
一稀释度小于3 0 个时， 则以接近3 0 或3 0 0 的平均菌落数乘以稀释倍数报告之( 见表中例6 ) ,
   6 . 6 若所有的稀释度均无菌生长， 报告数为每克或每毫升小于1 0 个.
   6 . 7 菌落计数的报告， 菌落数在1 0 以内时， 按实有数值报告之， 大于1 0 0时. 采用二位有效数字， 在
二位有效数字后面的数值， 应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数， 可用1 0 的指数来表示
( 见下表报告方式栏) 。在报告菌落数为“ 不可计” 时， 应注明样品的稀释度。GB  7 91 8 .  2 一 87
细菌计数结果及报告方法
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